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KIAA1549-BRAF/BaF3

CBP73384

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產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫(kù)
I. Background
      BRAF 基因是位于人類 7 號(hào)染色體長(zhǎng)臂(7q34)的原癌基因,編碼絲氨酸/蘇氨酸蛋白 激酶,屬于 RAF 激酶家族,參與 MAPK 信號(hào)通路調(diào)控細(xì)胞增殖、分化及存活。其最常見(jiàn) 的突變類型為 V600E 突變(約占 80%以上),該突變導(dǎo)致蛋白持續(xù)激活,引發(fā)細(xì)胞異常增 殖,與黑色素瘤(約 30-60%)、甲狀腺乳頭狀癌(約 40-45%)、結(jié)直腸癌(約 10-15%) 等多種惡性腫瘤密切相關(guān)。

      BRAF 突變分為三類:I 類(如 V600E,單體激活)、II 類(二聚體激活)和 III 類 (失活突變),其中 I 類對(duì) BRAF 抑制劑(如達(dá)拉非尼、維莫非尼)敏感,雙靶治療(達(dá) 拉非尼+曲美替尼)可顯著延長(zhǎng)患者生存期。BRAF 基因檢測(cè)在腫瘤診斷、靶向治療選擇、 預(yù)后評(píng)估及耐藥監(jiān)測(cè)中具有重要臨床價(jià)值,是精準(zhǔn)醫(yī)療的關(guān)鍵靶點(diǎn)之一。

      KIAA1549 基因位于 7q34,編碼 UPF0606 家族蛋白。其與 BRAF 基因融合(如 Ex16- Ex9)在兒童低級(jí)別膠質(zhì)瘤(如毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤)中高發(fā)(50-70%),導(dǎo)致 MAPK 通 路持續(xù)激活,引發(fā)腫瘤。此類腫瘤生長(zhǎng)緩慢,預(yù)后良好,靶向藥物如曲美替尼顯療效,是 重要診斷標(biāo)志物。
 
II. Description
      BaF3(小鼠原 B 細(xì)胞)的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達(dá)激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅(qū)動(dòng)基因,用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用,原理及流程見(jiàn)下圖所示。



Figure 1. 
KIAA1549-BRAF BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖
 
III. Introduction
Cell Line Name: KIAA1549-BRAF/BaF3
Host Cell: Ba/F3
Stability: 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application: Anti-proliferation assay and PD assay
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml Puromycin
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data

1. WB of KIAA1549-BRAF/BaF3



Figure 2. WB of KIAA1549-BRAF/BaF3

2. Anti-proliferation assay

Figure 3. CTG Proliferation Assay of KIAA1549-BRAF BaF3 (C1).

 

 

 

 

 

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